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恒溫搖床振幅如何正確選擇?
2023-04-27
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作者:庫侖儀器

搖床振幅如何正確選擇? 

1、什么是搖床的振幅?

搖床的振幅指托盤在做圓周運動時候的直徑,有時候我們也叫“振蕩直徑”或“軌道直徑”符號:。上海智城提供了0-50MM(無級調速),國內首創(chuàng),專利產(chǎn)品,并參與起草了符合國家的恒溫振蕩器行業(yè)標準,進口某品牌提供振幅為3mm,25mm和50mm的搖床,其他國產(chǎn)的提供了26mm,30mm,50mm固定的三個段振幅選擇。

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2、什么是氧氣傳遞效率(OTR)?

氧氣傳遞效率是指,氧氣從大氣中傳入到液體中的效率。OTR數(shù)值越高,氧傳遞效率越高。

 

3、振幅和轉速的影響

這兩個因素都會影響培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基的混合。 混合效果越好,氧傳遞速率(OTR)就越好。遵循這些指導原則,可以選擇最適合的振幅和轉速。

一般來說,選擇25mm振幅可以作為萬能振幅應用于所有培養(yǎng)。

正因為如此,大多搖床的振幅都是25毫米。在一些應用中,如果對氧傳遞/細胞生長有特殊的限制,可能會選擇一些特殊的振幅。

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4、細菌,酵母和真菌培養(yǎng):

搖瓶中的氧氣傳遞效率比生物反應器低得多。多數(shù)情況下氧傳遞可能是搖瓶培養(yǎng)的限制因素。振幅與錐形培養(yǎng)瓶的大小相關:大瓶使用大振幅。

建議:25mm振幅應用于從25毫升到2升的錐形培養(yǎng)瓶,50mm振幅應用于2升至5升的錐形培養(yǎng)瓶。

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5、細胞培養(yǎng):

* 然而,哺乳動物細胞培養(yǎng)對氧氣的需求相對較低,較低的功率輸入即可

* 對于250mL搖瓶,在較為寬廣的振幅和振速范圍(20-60mm振幅;100-300rpm)都可以提供足夠的氧氣傳遞。

* 如果直徑較大的燒瓶(Fernbach燒瓶)推薦使用50毫米振幅

* 使用一次性培養(yǎng)袋,推薦使用50mm振幅。

 

6、微孔板和深孔板:

對微孔板和深孔板有兩種不同的方法可以獲得最大的氧氣轉移!

* 50mm振幅,轉速不低于250rpm

* 使用3mm振幅,轉速在800-1000rpm

 

7、請注意以下幾點

在許多情況下即使選擇了合理的振幅,也未必能增加生物培養(yǎng)量,因為培養(yǎng)量的增加會受到多個因素影響。舉例:如果十個因素中有一兩個不理想,那么無論其他因素有多好,培養(yǎng)量的增長都是有限的,或者可以這樣說,如果培養(yǎng)量的受限因素只有氧傳遞時,振幅的正確選擇會得到明顯的培養(yǎng)箱增加。比如,碳源若是受限因素,無論氧傳遞效果多好,也不會達到理想的培養(yǎng)量。

振幅和轉速

振幅和轉速都會對氧傳遞造成影響。如果在轉速很低(比如100rpm)的細胞培養(yǎng)中,振幅的不同對氧傳遞幾乎沒有明顯影響。要達到最高的氧傳遞效果,首先是盡可能的提高轉速,托盤會適當?shù)钠胶廪D速。并不是所有的培養(yǎng)物都能夠在高速震蕩下良好生長,一些對剪切力敏感的培養(yǎng)物,高轉速會導致培養(yǎng)物死亡。

其他影響因素

* 裝液量,錐形燒瓶的裝液量為不超過總體積的三分之一。如果要達到最大氧傳遞,裝液量不能超過10%。永遠不要將裝液量達到50%。

* 擾流板:在所有類型的培養(yǎng)中,擾流板都有效提高氧傳遞。有些廠家推薦使用“超高產(chǎn)量”培養(yǎng)瓶。這種瓶的擾流板會增大液體摩擦力,搖床可能會達不到最大設定轉速。

振幅和轉速的關聯(lián)關系

搖瓶中的離心力可以通過下面公式計算

FC=rpm2 ×振幅,離心力和振幅間存在線性關系:如果使用25mm振幅 到 50mm振幅(轉速相同),離心力增加了2倍。

離心力和轉速存在平方關系:

如果轉速提高到2倍(振幅相同),離心力提高4倍。如果轉速提高到3倍,離心力則提高9倍!如果用振幅25mm,在給定的速度下,進行培養(yǎng)。如果希望用振幅50mm,達到相同的離心力,轉速應該用1/2的平方根計算,因此您應該使用70%的轉速,達到形同的培養(yǎng)條件。

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